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王辉丨临床微生物学检验标本的采集和转运 [复制链接]

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讲者丨王辉整治丨刘安云(皖病院)责编丨吴怀英/米宏霏泉源丨年宇宙感控与耐药感化大会微生物检讨终归是临床医生在调理感化历程中所须要的要害消息,病原学诊断是临床调理感化性疾病的一项旧例本领,惟独熟悉病原学和药敏终归,本领做到取舍无误的抗菌药物,楷模、公道用药,同时缩小细菌耐药产生,节用调理资本,下降病死率。而无误的采集、管教与输送标本是临床微生物检讨胜利与否的关键,并直接影响到检讨终归。今朝各调理机构临床微生物标实品质参差不齐,严峻影响了微生物检讨终归的明确性和对临床诊断的疏导意义。为楷模临床微生物学检讨标本采集和转运手艺请求,国度卫健委于年12月11日颁布了《临床微生物学检讨标本的采集和转运》(WS/T—,年6月1日正式推行),在“宇宙感控与耐药感化大会”——微生物标本全过程办理专场上,病院检讨科的王辉教师对本行业准则停止了详细解读,信托会为临床医护人员现实实行供应指点。一、临床微生物室的重点性能供应倏地、明确的病原学诊断供应最凑近实在的药敏终归,疏导临床公道运用抗菌药物细菌耐药性监测与剖析,为临床抗感化阅历性调节提病院感化的产生国度卫健委文献提议加倍微生物标本采集、送检行业准则的宣贯与实行行业准则WS/T-于-6-1正式推行二、WS/T-准则拟订历程-12月立项,年4月实行“指南”框架的拟订。年5月~12月:实行“指南”办事组议论稿初稿。年12月~年3月:实行“指南”送审议论稿。年3月30日送审。年11月8日准则会审。年11月8日准则会审。近位大师条意见。–临床微生物学、感化节制、儿科–呼吸与危重症学科、眼科和耳鼻喉科–神经外科、照顾部、肾内科和妇科–中华医学会感化病学分会委员三、WS/T-准则实用范畴实用于开展临床微生物学检讨的各级调理机构及其临床微生物学试验室。本准则规章了临床微生物学(病*学、细菌学和真菌学)检讨标本采集和转运的手艺请求。包罗标本采集、转运及管教总法则和临床罕见标本的采集、转运及管教。罕见标本范例:–血造就标本、脑脊液标本、腹腔标本(腹水、腹膜透析液)、胸水–布局标本(外科手术采集的布局标本、经支气管镜肺活检的布局标本、CT带领下经皮肺穿刺肺活检布局标本、心律植入安装感化标本和关节假体领域感化标本)–尿液标本(导尿管尿液、中段尿液、耻骨上膀胱穿刺尿液和婴幼儿尿液)–支气管镜标本(支气管毛刷和支气管肺泡灌洗液)、痰(咳痰、启蒙痰平和管吸痰)、鼻咽拭子、口咽拭子–粪便标本、直肠拭子和肛拭子–子宫颈内或宫颈标本、男性泌尿繁殖道标本–眼科标本、耳标本–皮肤结缔布局及伤口标本四、何如无误懂得楷模1.拟订临床微生物学检讨标本采集手册,该手册供应的消息应包罗(但不限于)如下体例:检讨项目检讨法子适应症标本范例标本采集所须要的安装/容器和转运造就基(无菌、无消*剂及防腐剂、无混浊、密封性好、透亮以便于从外部调查)标本采集法子标本的体积和品质(阳性率)转运时限、储存前提(苛养菌)标本的标记法子反复检讨频次生物平安防备消息须要取得的临床材料2.应包罗特别病原体的造就请求:拉长造就光阴比方:血液标本质疑巴尔通体、布鲁菌、弗朗西斯菌等引发的感化,呼吸道标本质疑诺卡菌引发的感化应拉长造就光阴。取舍专用造就基比方:血液中质疑分枝杆菌感化应取舍专用的分枝杆菌造就瓶。特别的气体和温度处境请求比方:脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等须要CO2处境,屈曲菌和幽门螺杆菌造就须要微需氧处境;质疑二相真菌感化,宜同时取舍25℃及37℃两个温度停止造就。特定感化应停止厌氧造就比方:肝脓肿等关闭脓肿、腹膜炎、腹腔感化、糖尿病足感化等。五、教会临床大夫何如开检讨单试验室应确立临床微生物学检讨的请求程序检讨请求单应供应的消息包罗(但不限于)如下体例:六、临床大夫何如取舍检讨项目无菌体液标本、布局、痰、BALF、尿液、脓液标本等:宜同时取舍标本直接涂片染色镜检和造就。质疑隐球菌感化的脑脊液标本:宜同时取舍墨汁染色、隐球菌荚膜抗原检讨和隐球菌造就。质疑分枝杆菌感化的标本:宜同时取舍抗酸染色、分枝杆菌造就和分枝杆菌核酸检讨。质疑厌氧菌感化的标本:宜同时取舍革兰染色和厌氧造就,不能消除需氧菌时,宜同时做需氧造就。质疑诺卡菌感化的标本:宜同时取舍革兰染色、弱抗酸染色和造就。质疑侵蚀性真菌感化的标本:宜同时取舍10%KOH压片、真菌造就和真菌抗原检讨;另可停止乳酸酚棉兰染色或荧光染色等。七、甚么样的标本适当/不适当普遍细菌造就厌氧菌造就八、标本的采集机遇、部位、法子应在抗微生物药物调节以前或在开始调节后当即采集、疾病初发时采集首份标本。调节中评价疗效、调节后评价终局。应防止感化部位领域以及感化部位左近皮肤或粘膜定植菌群的混浊。呼吸道病*:宜采纳植绒拭子采集鼻咽标本。质疑细菌、真菌、厌氧菌感化:除了血液标本外,其余悉数标本均宜停止革兰染色镜检。无菌体液:无菌管送检,或注入必然量(最好10mL)到血造就瓶中增菌造就。外科手术标本:应送液体或布局做涂片和造就,拭子标本仅用于特别处境。病*血清学检讨:应按照不同病*取舍不同的采集光阴和抗体范例。特别处境下(如质疑厌氧菌感化时):能够思虑床旁采样。标本采集应相符生物平安规章。九、标本的采集量应采集充足量的标本用于旧例细菌学检讨,起码送检0.5mL或许0.5g(除外特别标本)。当送检标实质积不够时,应与临床疏通,并按照医嘱取舍优先检讨项目。脑脊液标本普遍2mL~5mL。胸水和腹水10mL。BALF标本10mL。脓液2mL~5mL。羊水、胆汁、关节穿刺液、心包液、胸腔积液、滑膜液大于1mL。腹透液50mL刻下房液大于0.1mL,玻璃体洗液大于1mL。十、标本的转运法则标本采集手册应精确表明某些检讨项目标特别转运法子。标本的转运应由经由培训的专人负责。标本采集后,应缩小输送枢纽,在规守光阴内运达试验室,并尽或许收缩转运光阴。标本的转运请求十一、标本的接受和拒收标本的接受标本来到试验室后应纪录接受光阴和管教光阴。接受标本时应详尽校阅标本和检讨请求单。标本的拒收应拒收标本标记差错或无患者姓名的标本;应拒收标本范例和请求检讨项目不符的标本;应拒收品质评价不及格的标本;采集部位、转运容器以及转运前提不相符请求,宜从新采集标本。稀奇表明试验室应精确规章哪些处境容许特别管教不及格标本;规章特别管教历程中哪些枢纽须要核实和纪录,规章能停止特别管教的负责人;经特别管教的不及格标本的检讨终归应在检讨终归汇报中精确标出。十二、标本的优先管教法则(一)应确立要害反省程序(二)精确须紧要急管教的标本范例、检讨项目、标本检讨挨次(三)试验室接受要害标本后应当即管教(四)要害反省标本包罗(但不限于)如下标本:涂片染色镜检终归应在2h内赶快反应给临床;脑脊液标本(直接涂片终归30min内发汇报);血造就阳性标本(直接涂片终归1h内发汇报);来自手术室、重症监护室、急诊室的无菌部位标本;其余临床以为有须紧要急反省的标本。十三、标本转运:普遍细菌学检讨宜在2h内送到试验室。假若转运光阴高出2h,宜运用转运造就基或在冷藏前提下转运;血造就标本弗成以冷藏转运;仅用于分子诊断的标本,宜冷藏或冷冻保管(-70℃如下最好,防止屡次冻融)。标本量较少的体液标本(<1mL)或布局标本(<1cm3):宜在30min内送到试验室。大致积的标本或采集于保管造就基中的标本,能够保管24h。或许分散出对领域处境敏锐细菌的标本:采集后当即送检。对领域处境敏锐的细菌如百日咳鲍特菌、志贺菌属、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和厌氧菌。或许分散出对低温敏锐细菌的标本:采集后不宜冷藏,如脑脊液、繁殖道、眼部、中耳及呼吸道标本。对低温敏锐的细菌如淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌和肺炎链球菌。用于厌氧菌造就的标本:在常温下转运,标本量较少的标本宜在采集后30min内送到试验室,转运历程中标本尽或许与空气阻遏。十四、不同部位病原学标本采集与送检请求血造就适应证及采集套数脑脊液的采集与送检尽或许在抗菌药物运用前采集;不要冷冻脑脊液标本;首瓶极易被皮肤定植菌混浊,不该做涂片、造就和分子探测。胸、腹水的采集和送检胸水座位或半卧位,用超声或叩诊法子定位穿刺点;无菌操纵采集10mL或更多液体,置于无菌容器,室温当即送检。腹水依患者情景和腹水量,酌情取平卧、侧卧或半卧座位;无菌操纵采集10mL或更多液体,置于无菌容器,室温当即送检。腹膜透析液采集50mL腹膜透析液,置于无菌容器,室温当即送检;同时床旁接种5~10mL,离别打入需氧和厌氧血造就瓶,室温当即送检;若不能即刻送检,血造就瓶应置于37℃前提下孵育。布局标本的采集和送检外科手术采集的布局标本;经支气管镜肺活检的布局标本;CT带领下经皮肺穿刺肺活检布局标本。详细请求标本量:≥1cm3为好。应取舍适宜的采样法子以差别混浊和真实的感化。置于无菌保湿容器,小块布局宜用2mL无菌水或生理盐水保湿。厌氧菌造就:应采纳厌氧转运管或厌氧转运瓶输送。甲醛管教后的标本不能停止微生物学反省。如在统一个手术部位不同的地区采集隔开的布局,稀奇小块宜用方形潮湿的无菌纱布包好送检。布局厌氧菌造就,宜采纳厌氧转运瓶/管;大块布局标本可直接用于厌氧造就。皮肤、结缔布局标本的采集和送检紧闭性脓肿:消*皮肤后,用打针器抽取脓肿物,无菌变化至厌氧转运安装。怒放性脓肿:(1)无菌生理盐水或75%酒精去除表面渗出物。(2)尽或许采集抽吸物,或将采样拭子插入至病灶的底部或脓肿壁取其新鲜边沿部份。活检标本和抽吸物(脓液、渗出液)优于拭子标本脓疱或水疱1.酒精消*蒸发后,挑破脓疱,用拭子采集脓液。2.较大的脓疱:消*后宜直接用打针器抽取。3.破旧的脓疱:去除损伤表面混浊,用拭子擦拭损伤基底。蜂窝织炎液化后1.宜先打针无菌生理盐水随后抽吸。2.若患者病情赶快转机,或蜂窝织炎没有液化则须要采集布局活检标本。伤口标本的采集和送检1.伤口标本应辨别浅表伤口标本、深部伤口标本及外科手术伤口标本。宜从感化转机的前缘采集活检标本。2.烧伤伤口纯洁并扫除烧伤创面,有液体渗出时,用拭子擦拭取样。烧伤的布局宜做定量造就,定量检讨终归≥CFU/g则可预见有或许转机为创伤相干脓*症。3.溃疡或褥疮:用无菌生理盐水或75%酒精擦拭去除表面渗出物,尽或许采集抽吸物。关节假体领域感化标本的采集和送检引发假体关节领域感化的病原菌可产生生物膜,提倡临床在翻修术中同时送检假体、假体领域布局和关节液。术中取假体后,安放于塑料无菌容器中。调换手术刀采集4~5块布局,置于不同无菌小瓶中,表明响应部位。术前普遍关节液穿刺造就:宜在停用抗菌药物2周后采集。支气管镜标本的采集和送检支气管肺泡灌洗液经由20mL增量管道分5次贯注mL无菌生理盐水。无菌操纵下汲取10~20mLBALF,置于带螺帽无菌容器,当即送检。屡屡回汲取量应不低于贯注量的5%(总回收率以≥30%为好)。儿科患者只可贯注(1~2mL)/kg,普遍童子的回收量不高出10mL。支气管毛刷将反省用毛刷插入支气管镜,促成毛刷直至推出护套。刷取标本后将刷子抽庇护套,掏出一切毛刷。用无菌铰剪将刷子头剪下,放入1mL生理盐水或乳酸钠林格溶液中,当即送检。支气管抽吸物*支气管镜取材的标本会遭到上呼吸道菌群的混浊,应停止品质评价。痰标本的采集和送检咳痰向患者表明痰和唾液的差别。带假牙的患者摘掉假牙。净水漱口,使劲咳出深部痰,勿将唾液和鼻后渗出物看成痰咳出最好取舍晨起漱口后,咳出的深部痰,送检。启蒙痰(咳痰难题时)患者先刷牙(口腔粘膜、舌头和牙龈),勿用牙膏,再用无菌水或生理盐水漱口。用超声雾化器,患者吸入3%NaCl约3~5mL。用无菌螺帽宽口容器采集启蒙痰标本。气管吸痰*真菌和分枝杆菌诊断宜采集多份痰标本*痰标本不能停止厌氧造就口咽拭子法子采样者用压舌板静止舌头,用涤纶或藻酸钙拭子超出舌根到咽后壁及扁桃体隐窝、侧壁等处;屡次擦拭3~5次,采集粘膜细胞;微微掏出拭子,防止涉及舌头、悬垂体、口腔粘膜和唾液;拭子插反转运造就基中。诠释对化脓性咽炎,口咽拭仔细菌造就要紧用于筛查A群β-溶血链球菌和溶血潜匿杆菌;当检讨口咽拭子中的淋病奈瑟菌时,临床需提早见知试验室;关于儿科患者,宜旧例汇报流感嗜血杆菌;普遍处境下,不但独采用咽拭子标本诊断上呼吸道感化,宜与鼻咽拭子或鼻咽汲取物结合检讨以抬高呼吸道感化的病原检出率。泌尿繁殖道拭子标本的采集和送检子宫颈内或宫颈标本拭子插入宫颈管1~2cm,转2圈~3圈采集渗出物;须要时停止20s~30s并动弹取样;质疑淋病奈瑟菌时,能够同时采集直肠拭子与子宫颈标本。男性泌尿繁殖道标本从尿道挤压渗出物;最好采集两个拭子离别用于涂片和造就(响应的转运造就基);若无渗出物,可将拭子插入尿道约2cm,微微扭转掏出。尿液标本的采集和送检导尿管尿液标本直接导尿管尿液;留置导尿管尿液夹闭导尿管10~20min后,75%酒精消*导管采集部位,打针器无菌采集5~10mL尿液,置于无菌容器。中段尿液耻骨上膀胱穿刺尿液(可做厌氧菌造就)?消*脐部至耻骨地区,待消*剂完全蒸发后,麻醉穿刺部位(耻骨上2cm或2横指)。?从膀胱汲取约20mL尿液,置于无菌容器,当即送检。粪便标本的采集和送检粪便应在感化急性期采集,肠炎和发烧病人宜同时送检血造就。消除一些病原体的带领形态:须要不断3份标本阴性,隔断光阴为48h。挑取有黏液、脓液和血液的部份2~5mL或2~5g,不该混入尿液等异物。不断3天送检标本:社区取得性泻肚(住院前或72h内呈现病症);病院泻肚(住院72h后呈现病症)且至罕有如下处境之一:大于65岁并伴随根基疾病、HIV感化、粒缺(中性粒细胞<0.5×/mL)及疑似院内爆发。结肠造口术和回肠造口术标本(同粪便标本)标本拒收干枯的拭子、含钡粪便、*软成形便、干便、显然混浊的粪便。未运用输送造就基,采集后室温前提下高出2h未送检的粪便。运用输送造就基,4℃前提下保管高出48h或35℃前提下保管高出24h未送检标本。一天内反复送检标本。病院驰名微生物大师*文贵教师曾经说过:“你与我甚么样的标本,我与你甚么样的终归”,看来标实品质关于结尾检讨汇报终归的影响是相当要害的。是以,无误的标本采集、管教与转运,不只可使微生物检讨终归取得很好的保证,也会使标本的真阳性率进一步抬高,关于微生物病原检讨和精确化抗感化调节都具备举足轻重的意义。王辉教师从教会临床医生何如开具检讨单的细节动手,论述了标本的采集机遇、部位、法子、量等各方面详细请求,对《临床微生物学检讨标本的采集和转运》停止详尽解读,她强调:在临床停止微生物检讨时,须要拟订微生物标本的采集、输送、保管以及检讨等枢纽的楷模过程,以保证检讨历程的楷模化。高品质的标本并不能靠微生物室的一己之力,须要临床、照顾、标本输送等多部门的合营合做,以及对患者和家族教学宣扬等,信托经由王辉教师的详细解读,对咱们进修理解并践行本行业准则的体例请求,保险病原学标本的品质有很大辅助,为临床感化性疾病的诊断和调节供应牢固的根据!封面图片来自网络图文:王小虾预览时标签弗成点收录于合集#个
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