讲者丨王辉
整治丨刘安云（皖病院）
责编丨吴怀英/米宏霏
来历丨年寰宇感控与耐药传染大会
编者按
微生物检讨成果是临床医生在调理传染过程中所须要的重大讯息，病原学诊断是临床调理传染性疾病的一项惯例方式，惟有认识病原学和药敏成果，本领做到取舍无误的抗菌药物，范例、公道用药，同时节减细菌耐药孕育，俭朴养息资本，下降病死率。而无误的汇集、责罚与运输标本是临床微生物检讨胜利与否的关键，并直接影响到检讨成果。
方今各养息机构临床微生物标实品质参差不齐，严峻影响了微生物检讨成果的精确性和对临床诊断的引导意义。为范例临床微生物学检讨标本汇集和转运手艺请求，国度卫健委于年12月11日发表了《临床微生物学检讨标本的汇集和转运》（WS/T—，年6月1日正式践诺），在“寰宇感控与耐药传染大会”——微生物标本全过程经管专场上，病院检讨科的王辉传授对本行业准则停止了详细解读，确信会为临床医护人员本质实行供给指派。
一、临床微生物室的中心功效
供给倏地、精确的病原学诊断
供给最挨近靠得住的药敏成果，引导临床公道行使抗菌药物
细菌耐药性监测与剖析，为临床抗传染阅历性诊疗供给根据
病院传染的产生
国度卫健委文献提议强化微生物标本汇集、送检行业准则的宣贯与实行
行业准则WS/T-于-6-1正式践诺
二、WS/T-准则拟定过程
-12月立项，年4月实行“指南”框架的拟定。
年5月～12月：实行“指南”处事组商议稿原稿。
年12月～年3月：实行“指南”送审商议稿。
年3月30日送审。
年11月8日准则会审。
年11月8日准则会审。
近位大师条意见。
–临床微生物学、传染掌握、儿科
–呼吸与危重症学科、眼科和耳鼻喉科
–神经外科、照看部、肾内科和妇科
–中华医学会传得病学分会委员
三、WS/T-准则合用规模
合用于开展临床微生物学检讨的各级养息机构及其临床微生物学实习室。
本准则规章了临床微生物学（病*学、细菌学和真菌学）检讨标本汇集和转运的手艺请求。
包含标本汇集、转运及责罚总绳尺和临床罕见标本的汇集、转运及责罚。
罕见标本范例：
–血扶直标本、脑脊液标本、腹腔标本（腹水、腹膜透析液）、胸水
–布局标本（外科手术汇集的布局标本、经支气管镜肺活检的布局标本、CT领导下经皮肺穿刺肺活检布局标本、心律植入安装传染标本和关节假体四周传染标本）
–尿液标本（导尿管尿液、中段尿液、耻骨上膀胱穿刺尿液和婴幼儿尿液）
–支气管镜标本（支气管毛刷和支气管肺泡灌洗液）、痰（咳痰、向导痰和睦管吸痰）、鼻咽拭子、口咽拭子
–粪便标本、直肠拭子和肛拭子
–子宫颈内或宫颈标本、男性泌尿繁殖道标本
–眼科标本、耳标本
–皮肤结缔布局及伤口标本
四、何如无误明白范例
1.拟定临床微生物学检讨标本汇集手册，该手册供给的讯息应包含（但不限于）下列体例：
检讨项目
检讨法子
适应症
标本范例
标本汇集所须要的安装/容器和转运扶直基（无菌、无消*剂及防腐剂、无混浊、密封性好、通明以便于从外部观看）
标本汇集法子
标本的体积和品质（阳性率）
转运时限、储备前提（苛养菌）
标本的标帜法子
反复检讨频次
生物平安防备讯息
须要得到的临床材料
2.应包含非常病原体的扶直请求：
伸长扶直工夫
比如：血液标本质疑巴尔通体、布鲁菌、弗朗西斯菌等引发的传染，呼吸道标本质疑诺卡菌引发的传染应伸长扶直工夫。
取舍专用扶直基
比如：血液中质疑分枝杆菌传染应取舍专用的分枝杆菌扶直瓶。
非常的气体和温度处境请求
比如：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等须要CO2处境，蜿蜒菌和幽门螺杆菌扶直须要微需氧处境；质疑二相真菌传染，宜同时取舍25℃及37℃两个温度停止扶直。
特定传染应停止厌氧扶直
比如：肝脓肿等紧闭脓肿、腹膜炎、腹腔传染、糖尿病足传染等。
五、教会临床医生何如开检讨单
实习室应创设临床微生物学检讨的请求程序
检讨请求单应供给的讯息包含（但不限于）下列体例：
六、临床医生何如取舍检讨项目
无菌体液标本、布局、痰、BALF、尿液、脓液标本等：宜同时取舍标本直接涂片染色镜检和扶直。
质疑隐球菌传染的脑脊液标本：宜同时取舍墨汁染色、隐球菌荚膜抗原检讨和隐球菌扶直。
质疑分枝杆菌传染的标本：宜同时取舍抗酸染色、分枝杆菌扶直和分枝杆菌核酸检讨。
质疑厌氧菌传染的标本：宜同时取舍革兰染色和厌氧扶直，不能清除需氧菌时，宜同时做需氧扶直。
质疑诺卡菌传染的标本：宜同时取舍革兰染色、弱抗酸染色和扶直。
质疑侵蚀性真菌传染的标本：宜同时取舍10%KOH压片、真菌扶直和真菌抗原检讨；另可停止乳酸酚棉兰染色或荧光染色等。
七、甚么样的标本恰当/不恰当
常常细菌扶直
厌氧菌扶直
八、标本的汇集机会、部位、法子
应在抗微生物药物诊疗以前或在肇始诊疗后即时汇集、疾病初发时汇集首份标本。
诊疗中评价疗效、诊疗后评价究竟。
应防止传染部位四周以及传染部位左近皮肤或粘膜定植菌群的混浊。
呼吸道病*：宜采纳植绒拭子汇集鼻咽标本。
质疑细菌、真菌、厌氧菌传染：除了血液标本外，其余整个标本均宜停止革兰染色镜检。
无菌体液：无菌管送检，或注入必然量（最好10mL）到血扶直瓶中增菌扶直。
外科手术标本：应送液体或布局做涂片和扶直，拭子标本仅用于非常情景。
病*血清学检讨：应凭借不同病*取舍不同的汇集工夫和抗体范例。
非常情景下（如质疑厌氧菌传染时）：能够思考床旁采样。
标本汇集应恰当生物平安规章。
九、标本的汇集量
应汇集充满量的标本用于惯例细菌学检讨，起码送检0.5mL或许0.5g（除外非常标本）。
当送检标实质积不够时，应与临床疏通，并凭借医嘱取舍优先检讨项目。
脑脊液标本常常2mL～5mL。
胸水和腹水10mL。
BALF标本10mL。
脓液2mL～5mL。
羊水、胆汁、关节穿刺液、心包液、胸腔积液、滑膜液大于1mL。
腹透液50mL
当前房液大于0.1mL，玻璃体洗液大于1mL。
十、标本的转运绳尺
标本汇集手册应明了阐述某些检讨项方针非常转运法子。
标本的转运应由经由培训的专人负责。
标本汇集后，应节减运输枢纽，在规按工夫内运达实习室，并尽大概缩小转运工夫。
标本的转运请求
十一、标本的采纳和拒收
标本的采纳
标本来到实习室后应纪录采纳工夫和责罚工夫。
采纳标本时应用心核查标本和检讨请求单。
标本的拒收
应拒收标本符号差错或无患者姓名的标本；
应拒收标本范例和请求检讨项目不符的标本；
应拒收品质评价不及格的标本；
汇集部位、转运容器以及转运前提不恰当请求，宜从新汇集标本。
非常阐述
实习室应明了规章哪些情景准许非常责罚不及格标本；
规章非常责罚过程中哪些枢纽须要核实和纪录，规章能停止非常责罚的负责人；
经非常责罚的不及格标本的检讨成果应在检讨成果汇报中明了标出。
十二、标本的优先责罚绳尺
（一）应创设重大反省程序
（二）明了须急迫急责罚的标本范例、检讨项目、标本检讨依序
（三）实习室采纳重大标本后应即时责罚
（四）重大反省标本包含（但不限于）下列标本：
涂片染色镜检成果应在2h内敏捷反应给临床；
脑脊液标本（直接涂片成果30min内发汇报）；
血扶直阳性标本（直接涂片成果1h内发汇报）；
来自手术室、重症监护室、急诊室的无菌部位标本；
其余临床觉得有须急迫急反省的标本。
十三、标本转运：常常细菌学检讨
宜在2h内送到实习室。即使转运工夫超越2h，宜行使转运扶直基或在冷藏前提下转运；血扶直标本弗成以冷藏转运；仅用于分子诊断的标本，宜冷藏或冷冻保管（-70℃下列最好，防止屡次冻融）。
标本量较少的体液标本（＜1mL）或布局标本（＜1cm3）：宜在30min内送到实习室。大致积的标本或汇集于保管扶直基中的标本，能够保管24h。
大概分散出对四周处境敏锐细菌的标本：汇集后即时送检。对四周处境敏锐的细菌如百日咳鲍特菌、志贺菌属、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和厌氧菌。
大概分散出对低温敏锐细菌的标本：汇集后不宜冷藏，如脑脊液、繁殖道、眼部、中耳及呼吸道标本。对低温敏锐的细菌如淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌和肺炎链球菌。
用于厌氧菌扶直的标本：在常温下转运，标本量较少的标本宜在汇集后30min内送到实习室，转运过程中标本尽大概与空气阻隔。
十四、不同部位病原学标本汇集与送检请求
血扶直适应证及汇集套数
脑脊液的汇集与送检
尽大概在抗菌药物行使前汇集；
不要冷冻脑脊液标本；
首瓶极易被皮肤定植菌混浊，不该做涂片、扶直和分子探测。
胸、腹水的汇集和送检
胸水
座位或半卧位，用超声或叩诊法子定位穿刺点；
无菌职掌汇集10mL或更多液体，置于无菌容器，室温即时送检。
腹水
依患者境况和腹水量，酌情取平卧、侧卧或半卧座位；
无菌职掌汇集10mL或更多液体，置于无菌容器，室温即时送检。
腹膜透析液
汇集50mL腹膜透析液，置于无菌容器，室温即时送检；
同时床旁接种5～10mL，离别打入需氧和厌氧血扶直瓶，室温即时送检；
若不能立刻送检，血扶直瓶应置于37℃前提下孵育。
布局标本的汇集和送检
外科手术汇集的布局标本；
经支气管镜肺活检的布局标本；
CT领导下经皮肺穿刺肺活检布局标本。
详细请求
标本量：≥1cm3为好。
应取舍恰当的采样法子以差别混浊和真实的传染。
置于无菌保湿容器，小块布局宜用2mL无菌水或生理盐水保湿。
厌氧菌扶直：应采纳厌氧转运管或厌氧转运瓶运输。
甲醛责罚后的标本不能停止微生物学反省。
如在统一个手术部位不同的地域汇集隔开的布局，非常小块宜用方形潮湿的无菌纱布包好送检。
布局厌氧菌扶直，宜采纳厌氧转运瓶/管；大块布局标本可直接用于厌氧扶直。
皮肤、结缔布局标本的汇集和送检
并拢性脓肿：消*皮肤后，用打针器抽取脓肿物，无菌变化至厌氧转运安装。
盛开性脓肿：（1）无菌生理盐水或75%酒精去除表面渗出物。
（2）尽大概汇集抽吸物，或将采样拭子插入至病灶的底部或脓肿壁
取其新鲜边际部份。
活检标本和抽吸物（脓液、渗出液）优于拭子标本
脓疱或水疱
1.酒精消*蒸发后，挑破脓疱，用拭子汇集脓液。
2.较大的脓疱：消*后宜直接用打针器抽取。
3.破旧的脓疱：去除损伤表面混浊，用拭子擦拭损伤基底。
蜂窝织炎液化后
1.宜先打针无菌生理盐水随后抽吸。
2.若患者病情敏捷希望，或蜂窝织炎没有液化则须要汇集布局活检标本。
伤口标本的汇集和送检
1.伤口标本
应分辨浅表伤口标本、深部伤口标本及外科手术伤口标本。
宜从传染希望的前缘汇集活检标本。
2.烧伤伤口
洁净并断根烧伤创面，有液体渗出时，用拭子擦拭取样。
烧伤的布局宜做定量扶直，定量检讨成果≥CFU/g则可预见有大概希望为创伤关联脓*症。
3.溃疡或褥疮：用无菌生理盐水或75%酒精擦拭去除表面渗出物，尽大概汇集抽吸物。
关节假体四周传染标本的汇集和送检
引发假体关节四周传染的病原菌可孕育生物膜，创议临床在翻修术中同时送检假体、假体四周布局和关节液。
术中取假体后，安插于塑料无菌容器中。
改换手术刀汇集4～5块布局，置于不同无菌小瓶中，表明响应部位。
术前常常关节液穿刺扶直：宜在停用抗菌药物2周后汇集。
支气管镜标本的汇集和送检
支气管肺泡灌洗液
经由20mL增量管道分5次贯注mL无菌生理盐水。
无菌职掌下汲取10～20mLBALF，置于带螺帽无菌容器，即时送检。
屡屡回汲取量应不低于贯注量的5%（总回收率以≥30%为好）。
儿科患者只可贯注（1～2mL）/kg，常常童子的回收量不超越10mL。
支气管毛刷
将反省用毛刷插入支气管镜，推动毛刷直至推出护套。
刷取标本后将刷子抽袒护套，掏出一切毛刷。
用无菌铰剪将刷子头剪下，放入1mL生理盐水或乳酸钠林格溶液中，即时送检。
支气管抽吸物
*支气管镜取材的标本会遭到上呼吸道菌群的混浊，应停止品质评价。
痰标本的汇集和送检
咳痰
向患者阐述痰和唾液的差别。
带假牙的患者摘掉假牙。
净水漱口，使劲咳出深部痰，勿将唾液和鼻后渗出物算做痰咳出
最好取舍晨起漱口后，咳出的深部痰，送检。
向导痰（咳痰艰巨时）
患者先刷牙（口腔粘膜、舌头和牙龈），勿用牙膏，再用无菌水或生理盐水漱口。
用超声雾化器，患者吸入3%NaCl约3～5mL。
用无菌螺帽宽口容器汇集向导痰标本。
气管吸痰
*真菌和分枝杆菌诊断宜汇集多份痰标本
*痰标本不能停止厌氧扶直
口咽拭子
法子
采样者用压舌板停止舌头，用涤纶或藻酸钙拭子横跨舌根到咽后壁及扁桃体隐窝、侧壁等处；
屡次擦拭3～5次，汇集粘膜细胞；
悄悄掏出拭子，防止涉及舌头、悬垂体、口腔粘膜和唾液；
拭子插反转运扶直基中。
解释
对化脓性咽炎，口咽拭仔细菌扶直紧要用于筛查A群β-溶血链球菌和溶血隐蔽杆菌；
当检讨口咽拭子中的淋病奈瑟菌时，临床需提早示知实习室；
关于儿科患者，宜惯例汇报流感嗜血杆菌；
时时情景下，不光独采用咽拭子标本诊断上呼吸道传染，宜与鼻咽拭子或鼻咽汲取物连结检讨以升高呼吸道传染的病原检出率。
泌尿繁殖道拭子标本的汇集和送检
子宫颈内或宫颈标本
拭子插入宫颈管1～2cm，转2圈～3圈汇集渗出物；
须要时逗留20s～30s并滚动取样；
质疑淋病奈瑟菌时，能够同时汇集直肠拭子与子宫颈标本。
男性泌尿繁殖道标本
从尿道挤压渗出物；
最好汇集两个拭子离别用于涂片和扶直（响应的转运扶直基）；
若无渗出物，可将拭子插入尿道约2cm，悄悄扭转掏出。
尿液标本的汇集和送检
导尿管尿液标本
直接导尿管尿液；
留置导尿管尿液夹闭导尿管10～20min后，75%酒精消*导管汇集部位，打针器无菌汇集5～10mL尿液，置于无菌容器。
中段尿液
耻骨上膀胱穿刺尿液（可做厌氧菌扶直）
?消*脐部至耻骨地域，待消*剂完全蒸发后，麻醉穿刺部位（耻骨上2cm或2横指）。
?从膀胱汲取约20mL尿液，置于无菌容器，即时送检。
粪便标本的汇集和送检
粪便
应在传染急性期汇集，肠炎和发烧病人宜同时送检血扶直。
清除一些病原体的带领形态：须要接连3份标本阴性，隔断工夫为48h。
挑取有黏液、脓液和血液的部份2～5mL或2～5g，不该混入尿液等异物。
接连3天送检标本：
社区得到性泻肚（住院前或72h内涌现病症）；
病院泻肚（住院72h后涌现病症）且至罕有下列情景之一：大于65岁并伴随根底疾病、HIV传染、粒缺（中性粒细胞＜0.5×/mL）及疑似院内爆发。
结肠造口术和回肠造口术标本（同粪便标本）
标本拒收
干枯的拭子、含钡粪便、*软成形便、干便、显然混浊的粪便。
未行使输送扶直基，汇集后室温前提下超越2h未送检的粪便。
行使输送扶直基，4℃前提下保管超越48h或35℃前提下保管超越24h未送检标本。
一天内反复送检标本。
领悟
病院驰名微生物大师*文贵传授曾经说过：“你与我甚么样的标本，我与你甚么样的成果”，看来标实品质关于结尾检讨汇报成果的影响是相当重大的。因而，无误的标本汇集、责罚与转运，不只可使微生物检讨成果得到很好的保证，也会使标本的真阳性率进一步升高，关于微生物病原检讨和精确化抗传染诊疗都具备举足轻重的意义。王辉传授从教会临床医生何如开具检讨单的细节动手，论述了标本的汇集机会、部位、法子、量等各方面详细请求，对《临床微生物学检讨标本的汇集和转运》停止详尽解读，她强调：在临床停止微生物检讨时，须要拟定微生物标本的汇集、运输、保管以及检讨等枢纽的范例过程，以保证检讨过程的范例化。
高品质的标本并不能靠微生物室的一己之力，须要临床、照看、标本运输等多部门的合营连结，以及对患者和眷属扶直传播等，确信经由王辉传授的详细解读，对咱们进修明白并践行本行业准则的体例请求，保险病原学标本的品质有很大扶助，为临床传染性疾病的诊断和诊疗供给靠得住的根据！
封面图片来自网络
图文：王小虾
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